Novinky - Představení technologie extrakce nukleových kyselin

ⅠNkyselina ukleováinúvod

Nukleová kyselina se dělí na kyselinu deoxyribonukleovou (DNA) a kyselinu ribonukleovou (RNA), mezi nimiž se RNA podle různých funkcí dělí na ribozomální RNA (rRNA), messenger RNA (mRNA) a přenosovou RNA (tRNA).DNA se koncentruje hlavně v jádře, mitochondriích a chloroformu, zatímco RNA je distribuována hlavně v cytoplazmě.Jako materiální základ genové exprese hraje extrakce nukleových kyselin mimořádně důležitou roli ve výzkumu molekulární biologie a klinické molekulární diagnostice.Koncentrace a čistota extrakce nukleové kyseliny přímo ovlivní následnou PCR, sekvenování, konstrukci vektoru, enzymatické štěpení a další experimenty.

Ⅱ Metoda extrakce a čištění nukleových kyselin

① Metoda extrakce fenolem/chloroformem

Extrakce fenolem/chloroformem je klasická metoda pro extrakci DNA, která k ošetření vzorků používá hlavně dvě různá organická rozpouštědla, rozpouštění nukleové kyseliny na bázi DNA ve vodné fázi, lipidů v organické fázi a proteinů mezi těmito dvěma fázemi.Tato metoda má výhody nízké ceny, vysoké čistoty a dobrého účinku.Nevýhodou je složitá obsluha a dlouhá doba.

② Trizol metoda

Metoda Trizol je klasickou metodou pro extrakci RNA.Metoda Trizol se po odstředění chloroformem dělí na vodnou fázi a organickou fázi, ve které se RNA rozpustí ve vodné fázi, vodná fáze se přenese do nové EP zkumavky, po přidání isopropanolu se získá vysrážení a poté se čistí ethanolem.Tato metoda je vhodná pro extrakci RNA ze zvířecích tkání, buněk a bakterií.

③ Metoda čištění odstředivé kolony

Metoda čištění centrifugační kolony může specificky adsorbovat DNA prostřednictvím speciálních adsorpčních materiálů na bázi křemíkové matrice, zatímco RNA a protein mohou hladce projít, a poté použít vysokou sůl s nízkým PH ke kombinaci nukleové kyseliny, eluci s nízkým obsahem soli s vysokou hodnotou PH k oddělení a čištění nukleové kyseliny.Výhodou je vysoká koncentrace čištění, vysoká stabilita, není potřeba organického rozpouštědla a nízká cena.Nevýhodou je, že je potřeba odstřeďovat krok za krokem, více operačních kroků.

④ Metoda magnetických kuliček

Metoda magnetických kuliček spočívá v rozštěpení vzorku buněčné tkáně lyzátem, uvolnění nukleové kyseliny ve vzorku a poté jsou molekuly nukleové kyseliny specificky adsorbovány na povrchu magnetických kuliček, zatímco nečistoty, jako jsou proteiny a cukry, zůstávají v kapalina.Prostřednictvím kroků štěpení buněčné tkáně, navázání magnetických kuliček s nukleovou kyselinou, promývání nukleové kyseliny, eluce nukleové kyseliny atd. se nakonec získá čistá nukleová kyselina.Výhodou je jednoduchá obsluha a krátká doba použití bez nutnosti stupňovitého odstřeďování.Má nízké technické požadavky a může realizovat automatický a hromadný provoz.Specifická kombinace magnetických kuliček a nukleové kyseliny vytváří extrahovanou nukleovou kyselinu s vysokou koncentrací a čistotou.Nevýhodou je, že současná tržní cena je poměrně drahá.

⑤ Jiné metody

Kromě výše uvedených čtyř metod existují varné krakování, metoda koncentrované soli, metoda aniontového detergentu, ultrazvuková metoda a enzymatická metoda atd.

Ⅲ Typ extrakce nukleových kyselin

Foregene má přední světovou platformu Direct PCR, dvousloupcovou platformu pro izolaci RNA (pouze DNA + pouze RNA).Mezi hlavní produkty patří soupravy pro izolaci DNA/RNA, reagencie PCR a Direct PCR řady molekulárních lab.

① Celková extrakce RNA

Vzorky extrakce celkové RNA zahrnují krev, buňky, živočišné tkáně, rostliny, viry atd. Vysokou čistotu a vysokou koncentraci celkové RNA lze získat extrakcí celkové RNA, kterou lze použít při RT-PCR, čipové analýze, in vitro translaci, molekulární klonování, Dot Blot a další experimenty.

Foregen souvisejícíSoupravy pro izolaci RNA

Animal Total RNA Isolation Kit--Rychle a efektivně extrahujte vysoce čistou a vysoce kvalitní celkovou RNA z různých živočišných tkání.

Souprava pro izolaci buněčné celkové RNA--Vysoce purifikovanou a vysoce kvalitní celkovou RNA lze získat z různých kultivovaných buněk za 11 minut.

Plant Total RNA Isolation Kit--Rychle extrahujte vysoce kvalitní celkovou RNA ze vzorků rostlin s nízkým obsahem polysacharidů a polyfenolů.

Sada pro izolaci virové RNA- Rychle izolujte a čistěte virovou RNA ze vzorků, jako je plazma, sérum, bezbuněčné tělesné tekutiny a supernatanty buněčných kultur.

② Extrakce genomové DNA

Vzorky extrakce genomové DNA zahrnují půdu, výkaly, krev, buňky, živočišné tkáně, rostliny, viry atd. Extrakce genomové DNA může být použita při enzymatickém štěpení, konstrukci knihovny DNA, PCR, přípravě protilátek, hybridizační analýze Western blot, genovém čipu, vysoké - sekvenování propustnosti a další experimenty.

Foregen souvisejícíDNA izolační sady

Sada pro izolaci zvířecí tkáně DNA- Rychlá extrakce a purifikace genomové DNA z více zdrojů, jako jsou zvířecí tkáně, buňky atd.

Blood DNA Midi Kit (1-5ml)--Rychle vyčistěte vysoce kvalitní genomickou DNA z antikoagulované krve (1-5ml).

Bukální výtěr/FTA karta DNA Isolation Kit- Rychle vyčistěte vysoce kvalitní genomickou DNA ze vzorků bukálních výtěrů/FTA karet.

Sada pro izolaci rostlinné DNA-- Rychle vyčistěte a získejte vysoce kvalitní genomickou DNA ze vzorků rostlin (včetně polysacharidů a polyfenolových rostlinných vzorků)

③ Extrakce plazmidu

Plazmid je druh kruhové malé molekuly DNA v buňkách, která je běžným nosičem pro rekombinaci DNA.Metodou extrakce plazmidu je odstranění RNA, oddělení plazmidu od bakteriální genomové DNA a odstranění proteinu a dalších nečistot, aby se získal relativně čistý plazmid.

General Plasmid Mini Kit- Rychle čistěte vysoce kvalitní plazmidovou DNA z transformovaných bakterií pro rutinní experimenty molekulární biologie, jako je transformace a enzymatické štěpení

④ Jiné typy extrakce, extrakce miRNA atd.